Vector Laboratories公司TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑盒：常見問題解答

本篇為大家?guī)淼氖荲ector品牌的TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑盒常見問題解答，如大家想購買該試劑盒產品，或咨詢更多關于該產品的問題，技術方面的支持，都可以聯(lián)系Vector全國總代理商—欣博盛生物。

1、是否有已發(fā)表的參考文獻描述了TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑盒的應用？

答：是的。在科學文獻中有多篇已發(fā)表的參考文獻描述了該試劑盒的應用。具體請在SP-8400產品詳情頁的Citations部分中查閱相關參考文獻。

2、在應用TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑后的清洗步驟中，我可以使用PBS以外的緩沖液或去垢劑嗎？

答：不可以。我們發(fā)現(xiàn)使用TBS或HEPES緩沖液清洗會導致TrueVIEW試劑從組織脫落；去垢劑也是不相容的。

3、TrueVIEW工作液可以保存多久？

答：TrueVIEW工作液一旦配制完成后，可在工作臺或冰箱中(2-8℃)保存約48小時，可維持其活性或功能。而超過48小時，則建議丟棄未使用的TrueVIEW工作液并根據實驗需要配制新的工作液。

4、TrueVIEW能減少由脂褐素引起的自發(fā)熒光嗎？

答：TrueVIEW不能減少由脂褐素引起的自發(fā)熒光。TrueVIEW的工作液通過靜電作用機制，能顯著減少或消除因使用醛類固定劑而引起的熒光；也能有效減少來自膠原蛋白、彈性蛋白和紅細胞等組織成分的熒光。

5、當使用TrueVIEW時，我的組織切片變成藍色的了，這是正常的嗎？

答：這是正常的。TrueVIEW工作液呈藍色，會將組織切片“染成"藍色，這表示該試劑正在發(fā)生反應。不過切片上的藍色不會發(fā)出熒光，不會干擾免疫熒光應用。

6、使用TrueVIEW時，我可以使用哪些封片劑？

答：兩種TrueVIEW產品(SP-8400和SP-8500)均隨附提供2 mL的VECTASHIELD® Vibrance防熒光淬滅封片劑，建議使用隨附的封片劑以獲得最佳效果。我們發(fā)現(xiàn)，在使用TrueVIEW時，封片劑對維持高信噪比起著關鍵作用。目前，我們暫無充分的數據證明其他供應商的封片劑可以和TrueVIEW搭配使用。如果用其他封片劑替代VECTASHIELD® Vibrance，可能會導致效果不佳。

7、為什么TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑要在免疫熒光(IF)完成后才使用，而不是在實驗流程開始時使用？

答：在產品開發(fā)過程中，我們發(fā)現(xiàn)將TrueVIEW淬滅試劑應用在標準免疫熒光流程結束后，能實現(xiàn)最-理-想的自發(fā)熒光信號減弱效果。該試劑在封片時仍保留在組織上，從而實現(xiàn)持續(xù)的淬滅作用，并且對特異性的熒光信號幾乎不產生任何影響。然而，在染色流程非常簡短的應用中(例如使用直接與熒光基團偶聯(lián)的一抗)，在實驗開始時應用TrueVIEW淬滅試劑可能同樣有效。

TrueVIEW自發(fā)熒光淬滅試劑盒 

VectorLabs公司提供的True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒，旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結構造成的自發(fā)熒光。該試劑盒包含防熒光淬滅的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種)?？蛻魺o需單獨購買封片劑，經濟、實用。

SP-8400-15使用案例：

樣本：人胰腺(FFPE)，染色胰島素(綠色)，DAPI(藍色)。未使用TrueVIEW處理(左圖)；使用TrueVIEW處理(右圖)，自發(fā)熒光明顯減少，特異性染色得以保留。 

SP-8500使用案例：

樣本：人扁桃體(FFPE)，染色AE1/AE3(綠色)，DAPI(藍色)。未使用TrueVIEW處理(左圖)，使用TrueVIEW處理(右圖)，自發(fā)熒光明顯減少，特異性染色得以保留。

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